GIÁO TRÌNH

Giáo trình Vi sinh vật học

Science and Technology

Nhuộm bào tử

Tác giả: Nguyễn Lân Dũng

Nhuộm bào tử

Có hai phương pháp nhuộm

Nhuộm Lục Malachit (phương pháp Schaeffer-Fulton)

Vật liệu, hoá chất:

        Dung dịch Lục Malachite (Malachite green) bão hoà (khoảng 7,6%)

        Dung dịch Safranin 0,5% (xem nhuộm Gram)

Các bước tiến hành:

        Làm vết bôi và cố định tế bào như đối với nhuộm Gram.

        Nhuộm bằng dung dịch Lục Malachite trong 10 phút, rửa nước.

        Nhuộm lại bằng dung dịch Safranine trong 30 giây, rửa nước, thấm khô.

        Soi kính: dùng vật kính dầu 100×

Kết quả:

Bào tử có màu lục, tế bào có màu đỏ.

Chú ý: phân biệt bào tử với các hạt dị nhiễm cũng bắt màu lục

Nhuộm Carbolic Fuchsin

Vật liệu, hoá chất:

        Dung dịch A:

10 ml dung dịch Fuchsin kiềm bão hoà trong etanol (khoảng 10%)

100 ml dung dịch acid carbolic (phenol) 5% (trong nước).

Trộn đều với nhau (chuẩn bị trước khi dùng)

        Dung dịch B:

100 ml Etanol 95%

3 ml HCl đậm đặc

        Dung dịch C: 

30 ml dung dịch Xanh metylen (Methylene blue) bão hoà trong etanol (khoảng 2%)

100 ml dung dịch KOH 0,01% trong nước.

Trộn đều với nhau, để càng lâu càng tốt.

Các bước tiến hành:

        Làm vết bôi trên phiến kính, cố định tế bào.

        Nhỏ dung dịch A lên vết bôi, hơ nóng nhẹ bên dưới để bay hơi, tránh để sôi. Thêm dần dần thuốc nhuộm để không bị khô cạn, giữ trong 5 phút. Đợi nguội, đổ thuốc nhuộm đi.

        Dùng dịch B rửa cho đến khi vừa thấy vừa hết màu đỏ, rửa nước.

        Nhuộm lại bằng dung dịch B trong 2-3 phút, rửa nước, thấm khô.

        Soi kính: dùng vật kính dầu.

Kết quả: 

    Bào tử bắt màu đỏ, tế bào bắt màu xanh

Các bước tiến hành nhuộm Carbolic Fuchsin và ví dụ minh hoạ kết quả.

 
MỤC LỤC