GIÁO TRÌNH

Giáo trình Vi sinh vật học

Science and Technology

Nhuộm tiên mao

Tác giả: Nguyễn Lân Dũng

Nhuộm tiên mao

Vật liệu, hoá chất:

        Dung dịch A:   Acid tannic                              5 g

FeCl3                                      1,5 g

Formalin                                 2 ml

NaOH 1%                              1 ml

Nước cất                                100 ml

        Dung dịch B: 2 g AgNO3 hoà tan trong 100 ml nước cất, lấy 10 ml dể riêng. Nhỏ dung dịch NH4OH đậm đặc vào 90 mlcòn lại, thấy hình thành tủa rất đặc, tiếp tục nhỏ NH4OH vào cho đến khi tan hết tủa. Lấy 10ml AgNO3 đã bỏ ra ban đầu nhỏ từ từ vào dung dịch, thấy xuất hiện váng mỏng, tiếp tục nhỏ vào cho đến khi vừa tan hết váng thì thôi.

        Chuẩn bị phiến kính: rửa thật sạch, ngâm trong cồn, đốt cháy hết cồn rồi mới sử dụng.

Các bước tiến hành:    

        Hoạt hoá vi khuẩn 2-3 lần trước khi tiến hành nhuộm.

        Dùng que cấy vô trùng lấy vi khuẩn từ mặt thạch (mới cấy 18-24 giờ) hoà vào 1 giọt nước cất đặt giữa phiến kính, để nghiêng cho chảy về một phía, làm khô trong không khí.

        Cố định tế bào: hơ nhanh trên ngọn lửa đèn cồn 2-3 lần.

        Nhỏ dịch A lên vết bôi, giữ 10 phút, rửa bằng nước cất.

        Dùng dịch B cho chảy qua để loại hết nước. Nhuộm bằng dịch B trong 30-60 giây. Hơ nóng, để nguội rồi rửa lại bằng nước cất.

        Soi kính: dùng vật kính dầu 100×.

Kết quả:

Tế bào vi khuẩn bắt màu nâu thẫm, tiên mao bắt màu nâu.

Ví dụ minh hoạ kết quả nhuộm tế bào vi khuẩn và tiêm mao

 

 
MỤC LỤC